無菌實驗室主要用于微生物學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、生物化學(xué)、動物實驗、基因重組以及生物制品等研究使用的實驗室統(tǒng)稱潔凈實驗室或者生物安全實驗室。
一、無菌實驗室建造要求
1、無菌工作室應(yīng)矮小、平整,面積只需5平米左右,高2.2—2.3米,內(nèi)部裝修應(yīng)平整、光滑,無凹凸不平或棱角等,四壁及屋頂應(yīng)用不透水之材質(zhì),便于擦洗及殺菌。
2、室內(nèi)采光面積大,從室外應(yīng)能看到室內(nèi)情況。
3、為保證無菌室的潔凈,無菌室周圍需設(shè)緩沖走廊,走廊旁再設(shè)緩沖間,其面積可小于無菌室。
4、無菌室、緩沖走廊及緩沖間均設(shè)有日光燈及供消毒空氣用紫外燈,殺菌紫外燈離工作臺以1米為宜 ,其電源開關(guān)均應(yīng)設(shè)在室外。
5、無菌室與緩沖間進(jìn)出口應(yīng)設(shè)拉門,門與窗平齊,門縫要封緊,兩門應(yīng)錯開,以免空氣對流造成污染。
二、無菌潔凈室整體布局
1、潔凈室布局
根據(jù)樣品檢驗要求,一般應(yīng)至少包括更衣緩沖系統(tǒng)、微生物限度檢查室、無菌檢查室、陽性菌室和物流通道。更衣系統(tǒng)應(yīng)至少包括一更(含更鞋)、二更(含洗手)、緩沖以及人流走廊等。物流通道應(yīng)考慮凈污分流的布局,有條件的可設(shè)置污物走廊。
2、潔凈室的設(shè)計要求
凈化級別:潔凈走廊、檢查室、陽性菌室應(yīng)為一萬級;其他房間應(yīng)為十萬級,氣流組織:陽性菌室對走廊呈負(fù)壓,走廊對緩沖有5Pa的正壓;陽性菌室全排風(fēng),電氣控制:控制開關(guān)外置;設(shè)置通訊系統(tǒng)
3、結(jié)構(gòu)與要求
無菌潔凈室不宜設(shè)在底層,防潮、防霉、采光好,遠(yuǎn)離交通干道,廁所及污染區(qū),面積不超過10㎡,高度不超過2.4m,由兩個緩沖間、操作間組成。
操作間緩沖間之間應(yīng)有樣品傳遞窗,出入操作間和緩沖間的門不應(yīng)直對,操作間不得安裝下水道。
無菌室內(nèi)應(yīng)六面光滑平整,無縫隙,不起灰,不落塵,耐腐蝕,易清洗,墻壁與地面、墻壁與天花板連接處應(yīng)呈凹弧形。無菌室內(nèi)的照明燈應(yīng)嵌裝在天花板內(nèi),采光面積要大,光照應(yīng)分布均勻,光照度不低于300勒克斯。
緩沖間和操作間應(yīng)裝有紫外線殺菌燈(2-25w/m3)用于空氣消毒。紫外線波長200-300nm者具有殺菌作用,其中以265-266nm殺菌作用最強,這與DNA的吸收光譜范圍一致,其殺菌機理可能是在細(xì)菌細(xì)胞DNA中引起胸腺嘧啶雙聚體形成,從而干擾細(xì)菌細(xì)胞DNA復(fù)制,導(dǎo)致細(xì)菌變異死亡。紫外線殺菌燈1m以內(nèi)距離殺菌效果最佳,每次開燈照射時間為30min。應(yīng)定期檢查紫外線燈輻射強度,不得低于70μW·cm-21m距離。其缺點是穿透力弱,一張紙板可以阻礙光的透過,不能穿透固體物,故只能用作表面消毒及一些不耐熱或化學(xué)消毒劑物品的消毒。
4、溫度、濕度
無菌室內(nèi)溫度和相對濕度直接影響紫外殺菌燈的殺菌效果,故溫度最好控制在25±2℃,相對濕度40-60%。操作間或凈化工作臺的潔凈空氣應(yīng)保持對環(huán)境形成正壓,不低于49Pa。
5、操作間
無菌室內(nèi)應(yīng)安裝空氣除菌過濾層流裝置及調(diào)溫裝置。潔凈度要求:凈化工作臺潔凈度為100級,無菌室應(yīng)為10000級。操作間應(yīng)準(zhǔn)備乙醇燈(或煤氣燈),火柴,2%碘酊棉球及75%乙醇球、試管架、大小橡皮乳頭、砂輪、記號筆、無菌剪刀、鑷子、注射器等。微生物限度檢查無菌室操作間內(nèi)還應(yīng)有電子稱(感量為0.1g,最大稱量為300g為宜),電動勻漿儀等。
6、緩沖間
緩沖間內(nèi)應(yīng)有洗手盆,消毒液,無菌衣,帽,口罩,拖鞋等,緩沖間內(nèi)不應(yīng)放置培養(yǎng)箱和其他雜物。
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